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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞復(fù)蘇/凍存人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布。該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。

產(chǎn)品型號(hào):復(fù)蘇/凍存
更新時(shí)間:2025-06-29
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:661
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人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB0512h

組織來源 :肺動(dòng)脈組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

該細(xì)胞是一種多功能細(xì)胞,尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當(dāng)其受損,肺血管通透性升高導(dǎo)致肺水腫,在成年人呼吸窘迫綜合癥發(fā)生機(jī)制中具有重要意義。但是處于體內(nèi)多因素共同作用的復(fù)雜環(huán)境中,對(duì)肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和代謝以及病變發(fā)生機(jī)制很難作深入研究。原代肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能。


細(xì)胞特性

1) 組織來源于人的正常肺動(dòng)脈組織。

2) 細(xì)胞鑒定:CD31或血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


培養(yǎng)信息

包被條件 :PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培  養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消  化 液 :0.25%胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95%。CO2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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