熒光PCR檢測試劑盒是一種常用的分子生物學實驗工具，被廣泛應用于醫(yī)學、生物學、環(huán)境科學、農(nóng)業(yè)等領域。其作用是在PCR（聚合酶鏈式反應）過程中通過熒光信號檢測DNA序列特定變化，檢驗目標DNA是否存在、是否出現(xiàn)特定變異或突變等。

　　工作原理：PCR是一種在體外以無細胞為基礎的DNA復制技術，包括DNA的兩個變性、引物、擴增和DNA的再生。PCR檢測試劑盒的工作原理基本上是利用PCR技術，通過引入熒光標記物或探針來檢測PCR產(chǎn)物，轉(zhuǎn)化DNA目標序列的檢測結(jié)果為熒光信號。

　　熒光PCR檢測試劑盒常常需要精細操作；其中常見故障如下：

　　1.樣品制備

　　如果樣品處理不當，例如在提取DNA步驟中可能出現(xiàn)汗液、毛發(fā)等的污染，這會導致提取到的DNA不干凈，最終PCR產(chǎn)物會在雜質(zhì)的影響下產(chǎn)生不準確的結(jié)果。

　　2.引物的設計和選擇

　　引物的設計和選擇也十分重要，這與PCR靶標的選擇密切相關。引物太短或太長、引物和模板的匹配度不足、引物相互結(jié)合或雜交都可能導致PCR反應失敗或擴增效率降低。

　　3.信號檢測

　　在PCR過程中，檢測熒光信號的過程也會出現(xiàn)故障。例如缺乏熒光標記物，或熒光信號被干擾（如背景熒光、雜物熒光、光源不足等等），這些因素都可能導致結(jié)果不正確。